Edvotek kit nr. 222.
Dette eksperimentet fungerer med plasmidtransformerte bakterier. Ved hjelp av to forskjellige plasmider settes et grønt eller blått fluorescerende protein inn i E. coli-bakterier. Den fenotypiske forskjellen mellom de to transformerte bakteriene kan observeres direkte på kolonifargen, men er tydeligst når de belyses med langt UV-lys. Se fremgangsmåten i bildeserien.
Transformerte bakterier med pFluoroGreen og pFLuoroBlue satt inn kan gjenfinnes når de dyrkes på LB-ampicillinholdig agar og belyses med UV-lys.
Materialer til 10 grupper
Eksperimenttid 45 min + 5 min inkubering over natten
Utstyrsbehov:
Inkubator
1-2 vannbad
Bunsenbrenner/komfyr/mikrobølgeovn
Mikropipetter (5-50 µl) inkl. Tips
Pipettesuger
Markeringspenn
Varmebestandige hansker
Is til isbad
Lang UV-lyskilde
Leveres med alt nødvendig prøvemateriale i tillegg til utstyret ovenfor. Transformasjonscellene er frysetørket, slik at settet har en holdbarhet på ca. 9 måneder fra mottak. Leveres med alt nødvendig prøvemateriale, men uten ovennevnte utstyr.
Husk å finne den nyeste øvingsveiledningen på Edvoteks nettsider via lenken som følger med i settet.
Hvis du ønsker å arbeide med spektrofotometrisk bestemmelse, oppgis følgende data fra Edvotek: Eksitasjonstopp: 473 nm Emisjonstopp: 509 nm
.
